Eradication of a Mature Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) Biofilm From Acrylic Surfaces

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) can grow as structured biofilm in different surfaces, including oral mucosa and denture surfaces. Such biofilms can be released into the oral fluids and aspirated, causing systemic infections such as aspiration pneumonia. This study evaluated the efficacy of two disinfectant solutions and microwave irradiation in disinfecting acrylic specimens contaminated with MRSA biofilm. Thirty-six acrylic specimens were made, sterilized and contaminated with MRSA (107 cfu/mL). After incubation (37 °C/48 h), the specimens were divided into 4 groups: not disinfected (positive control); soaking in 1% sodium hypochlorite for 10 min; soaking in 2% chlorhexidine gluconate for 10 min; and irradiating by microwave for 3 min at 650 W. The viability of cells was evaluated by XTT reduction method. All specimens from the positive control group showed biofilm formation after 48 h incubation. The mean absorbance value of the control specimens was 1.58 (OD at 492 nm). No evidence of biofilm formation was observed on specimens after the disinfection methods. Disinfection by soaking in 1% sodium hypochlorite and 2% chlorhexidine gluconate and irradiating by microwaves resulted in 100% reduction of MRSA biofilm metabolism. The use of chemical solutions and microwave irradiation was shown to be effective for eradicating mature MRSA biofilms on acrylic resin specimens.

Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA, do inglês methicillin-resistant Staphylococcus aureus) pode crescer como biofilme estruturado em diferentes superfícies, incluindo mucosa bucal e superfícies de próteses. Estes biofilmes podem se dispersar nos fluidos orais e ser aspirados, causando infecções sistêmicas, como a pneumonia aspirativa. Este estudo avaliou a eficácia de duas soluções desinfetantes e irradiação por microondas na desinfecção de corpos-de-prova acrílicos contaminados com biofilme de MRSA. Trinta e seis espécimes de resina acrílica foram fabricados, esterilizados e contaminados com MRSA (107 ufc/mL). Após a incubação (37 °C/48 h), os espécimes foram divididos em quatro grupos: não desinfetados (controle positivo); imersos em hipoclorito de sódio 1% por 10 min; imersos em gluconato de clorexidina 2% por 10 min e irradiados por microondas durante 3 min a 650 W. A viabilidade das células foi avaliada pelo método de redução de XTT. Todos os espécimes do grupo controle apresentaram formação de biofilme após 48 h de incubação. O valor médio de absorbância destes espécimes foi de 1.58 (OD a 492 nm). Nenhuma evidência de formação de biofilme foi observada em todas as amostras desinfetadas. A desinfecção em hipoclorito de sódio 1%, gluconato de clorexidina 2% e irradiação em microondas resultou em 100% de redução do metabolismo do biofilme de MRSA. O uso de soluções químicas e irradiação em microondas mostrou-se eficaz na eliminação do biofilme maduro de MRSA sobre corpos-de-prova de resina acrílica.

Effectiveness of mechanical brushing with different denture cleansing agents in reducing in vitro Candida albicans biofilm viability

The adhesion of Candida albicans to surfaces is the prerequisite for occurrence of denture stomatitis, a common disease diagnosed among denture wearers. A routine of denture cleansing is essential to prevent biofilm formation and the onset of this infection. The aim of this study was to investigate the effectiveness of combining brushing and cleansing agents in killing C. albicans biofilm. Disks of acrylic resin were made, sterilized, and inoculated with C. albicans (10(7) cfu/mL). After incubation (37°C/48 h), specimens were randomly assigned to 10 experimental groups (n=9): 5 subjected to brushing with distilled water or cleansing agents - dentifrice slurry, 2% chlorhexidine gluconate (CHX), 1% sodium hypochlorite (NaOCl), and Polident fresh cleanse® (combined method) - and 4 exposed to the cleansing agents without brushing (immersion). Non-cleansed specimens were used as positive controls. The viability of cells was evaluated by XTT reduction method. Results were analyzed by Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests (α=0.05). The combined method was significantly more effective (p<0.0001) in reducing biofilm viability than the immersion. Brushing with CHX and NaOCl resulted in 100% removal of the biofilm. Immersion in the agents reduced significantly (p<0.0001) the biofilm viability, with CHX being the most effective (p<0.0001). The use of the combined method of brushing with cleansing agents is an effective method to reduce C. albicans biofilm, being CHX and NaOCl the most effective solutions.

A adesão de Candida albicans às superfícies é o primeiro passo para o desenvolvimento da estomatite protética, uma infecção frequente diagnosticada entre os usuários de próteses. Uma adequada higienização é essencial para prevenir a formação de biofilme microbiano e o início desta infecção. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da escovação com diferentes soluções na eliminação de biofilme de C. albicans. Para isso, discos de resina acrílica foram confeccionados, esterilizados e inoculados com uma suspensão de 10(7) células/mL de C. albicans. Após incubação (37°C/48 h), os espécimes foram aleatoriamente divididos em 10 grupos experimentais (n=9): 5 submetidos à escovação com água ou agentes de limpeza (água destilada, dentifrício, digluconato de clorexidina (CHX) a 2%, hipoclorito de sódio (NaOCl) a 1% e Polident fresh cleanse®) e 4 apenas imersos nos agentes de limpeza. Espécimes não submetidos à higienização foram utilizados como controle positivo. A viabilidade celular foi verificada pelo teste de redução do XTT. Os resultados obtidos foram analisados pelos testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (α=0,05). A escovação com todos os agentes de limpeza apresentou redução significativamente superior (p<0,0001) na viabilidade do biofilme quando comparada à exposição dos espécimes às soluções. Escovação com CHX a 2% e NaOCl a 1% resultaram em 100% de inativação do biofilme. A exposição aos agentes de limpeza resultou em redução significativa (p<0,0001) na viabilidade celular, com CHX a 2% sendo o mais efetivo (p<0,0001). A utilização de agentes de limpeza em associação ao método de escovação provou ser efetivo para reduzir biofilme C. albicans, sendo as soluções de CHX e NaOCl as mais efetivas.

Estomatite protética em pacientes com Diabetes mellitus: prevalência de Candida spp. e eficiência dos tratamentos com nistatina e desinfecção de próteses por micro-ondas / Denture stomatitis in diabetic patients: Candida spp. prevalence and efficacy of treatments with nystatin and denture microwave disinfection

Este estudo in vivo teve como objetivos avaliar: 1. a prevalência das diferentes espécies de Candida em pacientes diabéticos portadores de estomatite protética e compará-la àquela de pacientes não diabéticos com/sem estomatite protética; 2. a eficiência de dois tratamentos para estomatite protética em pacientes diabéticos: terapia antifúngica com nistatina e desinfecção de próteses totais por micro-ondas. Para isso, 210 pacientes usuários de prótese totais foram selecionados e distribuídos em três grupos de estudo. O grupo controle - GC foi formado por 90 pacientes não diabéticos e com mucosa oral saudável; os grupos experimentais foram formados por portadores de estomatite protética, sendo 80 pacientes não diabéticos - EPND e 40 diabéticos do tipo 2 controlados - EPD. Uma avaliação intra-oral dos pacientes dos grupos experimentais foi realizada e a aparência clínica da mucosa inflamada foi classificada de acordo com os critérios de Newton em graus I, II ou III. Coletas microbiológicas das próteses totais foram realizadas com swab estéril e plaqueadas em meio CHROMagar Candida. Em seguida, os procedimentos de identificação foram realizados: análise de microcultivo, teste de triagem fenotípica em caldo hipertônico e testes bioquímicos (ID-32C). Os resultados obtidos foram analisados por Intervalo de Confiança de Bonferroni e testes Exato de Fisher e Qui Quadrado (α=0,05). Os 40 pacientes diabéticos foram, então, submetidos ao tratamento da estomatite protética. Para isso, foram aleatoriamente distribuídos em 2 grupos (n=20): grupo NIS ­ tratamento com antifúngico tópico nistatina (suspensão oral - 100.000UI/mL), 4 vezes ao dia, por 14 dias; grupo MIC ­ tratamento por meio da irradiação das totais por micro-ondas (650W / 3 minutos), 3 vezes por semana, por 14 dias. Dois parâmetros foram utilizados para avaliar a efetividade dos tratamentos: microbiológico (coletas de material das próteses e das mucosas palatinas com swab estéril para quantificação de colônias viáveis ­ ufc/mL e identificação de Candida spp.) e clínico (tomadas fotográficas intra-orais das mucosas palatinas infectadas). Todos os pacientes foram submetidos a estes procedimentos previamente ao início dos tratamentos, ao seu final, e 30, 60 e 90 dias decorridos do seu início. Os valores de log10ufc/mL foram analisados estatisticamente por ANOVA subjacente a um modelo linear com efeitos aleatórios. A prevalência das espécies de Candida foi avaliada pelo teste Qui Quadrado. As avaliações qualitativas das fotografias intra-bucais e a análise da inflamação ao longo do tempo foram avaliadas, respectivamente, pelos testes Exato de Fisher e Mann-Whitney (α>05). Os resultados observados demonstraram que a C. albicans foi a espécie predominante em todos os grupos de estudo (p<0,016), seguida por C. tropicalis e C. glabrata (p>0,05). Não foram verificadas diferenças significantes (p>0,05) na prevalência de Candida spp. entre os grupos EPND e EPD. As prevalências de C. albicans e C. tropicalis foram significativamente superiores (p<0,01) nos grupos de pacientes com estomatite protética e a de C. tropicalis foi superior (p<0,05) nos pacientes diagnosticados com infecção grau III de Newton. Com relação aos tratamentos instituídos nos pacientes diabéticos, ambos reduziram significativamente (p<0,001) os valores de log10ufc/mL após 15 e 30 dias, não tendo sido encontradas diferenças estatisticamente significantes (p>0,05) entre os grupos de estudo. Não foram verificadas diferenças significantes (p>0,05) entre o número de pacientes curados e com recidivas, após a condução dos dois tratamentos. Com base nestes resultados, foi concluído que a prevalência de Candida spp. foi similar entre os pacientes diabéticos e não-diabéticos com estomatite protética. Apesar de a C.albicans ter sido a espécie mais frequentemente identificada em todos os pacientes avaliados, a prevalência de C. tropicalis foi superior nos pacientes com estomatite protética e naqueles com maior grau de inflamação, sugerindo que esta espécie pode estar envolvida com o início e a progressão da infecção. Além disso, a irradiação de próteses totais por micro-ondas pode ser utilizada com sucesso para tratar e prevenir o aparecimento de estomatite protética em pacientes diabéticos, apresentando a mesma efetividade de um método clássico de tratamento com antifúngico tópico

The aim of this in vivo study was to evaluate: 1. the prevalence of Candida spp. in well-controlled type 2 diabetic patients and compare it to that found in non-diabetics with/without denture stomatitis; 2. the efficacy of two treatments of denture stomatitis in diabetic patients: topical nystatin and denture microwave disinfection. Two hundred and ten denture wearer patients were divided into three groups of study. The control group - CG was formed by 90 individuals without diabetes or denture stomatitis and the experimental groups were formed by patients with denture stomatitis, being 80 non-diabetics - DSND and 40 well-controlled type 2 diabetics - DSD. Mucosal characteristics of denture stomatitis patients were classified in types I, II, and III, according to Newton's criteria. Mycological samples were taken from the dentures and cultured in CHROMagar's plates. Candida spp. were identified by micro-cultivation, hypertonic Sabouraud broth, and bioMérieux ID32C assays. Results were analyzed by means of Bonferroni corrected confidence interval, Fisher's exact test, and Chi-square analysis of several proportions (α=0.05). The 40 diabetic patients were divided into two groups (n=20) and submitted to two treatments for denture stomatitis: NYS group ­ patients were treated with topical nystatin, 4 times a day, for 14 days; MW group ­ patients had their dentures microwaved (650W / 3 minutes), 3 times per week, for 14 days. Mycological samples were taken from the palates and the tissue surface of the dentures for quantification and identification of Candida spp. and standardized photographs of the palates were taken for the clinical analysis. Microbiological and clinical evaluations were repeated at baseline, the end of treatments (day-14), and follow up (day-30, day60, day-90). Microbiological data were evaluated by ANOVA using a random effects statistical model,Tukey's post hoc test, and Chi-square test, while clinical results were analyzed by Mann-Whitney and Fisher's exact tests (α=0.05). According to the results, C. albicans was the most predominant species isolated in CG, DSND, and DSD groups (p<0.016), followed by C. tropicalis and C. glabrata (p>0.05). No significant differences were found in Candida spp. prevalence between DSND and DSD (p>0.05). The percentage frequencies of C. albicans and C. tropicalis in denture stomatitis groups (DSND and DSD) were significantly higher (p<0.01) than those in CG and the prevalence of C. tropicalis was significantly higher (p<0.05) in Newton's type III patients. Both NYS and MW treatments were considered successful in reducing the clinical signs of denture stomatitis and significantly reduced the values of cfu/mL from the palates and dentures at day-14 and day-30. Forty percent of patients had no signs of denture stomatitis at the end of both treatments. No significant differences (p>0.05) in the microbiological and clinical outcomes were revealed between the two treatments. It was concluded that the prevalence of Candida spp. was similar between diabetic and non-diabetic patients with denture stomatitis. Despite C. albicans was the most commonly isolated organism, the prevalence of C. tropicalis increased in patients with denture stomatitis and in those with the highest degree of inflammation, suggesting that this species may play an important role in the progression of this infection. In addition, denture microwave disinfection was as effective as nystatin on the treatment of well-controlled type 2 diabetic patients with denture stomatitis

Aplicação clínica dos conceitos oclusais na implantodontia / Clinical applications of occlusal principles in implantology

O sucesso clínico e a longevidade dos tratamentos reabilitadores com prótese sobre implantes osseointegrados estão diretamente relacionados ao controle biomecânico da oclusão. Em razão da ausência dos ligamentos periodontais, os implantes, ao contrário dos dentes naturais, reagem biomecanicamente de forma diferente às forças oclusais. Além disso, a sobrecarga sobre os implantes tem sido considerada a principal causa do aparecimento de complicações mecânicas ou de falha no tratamento após a colocação dos implantes em função. Dessa maneira, é essencial que os cirurgiões-dentistas conheçam as maneiras por meio das quais as cargas oclusais, normais ou excessivas podem influenciar ou sobrecarregar as próteses implanto-suportadas, a fim de que o esquema oclusal ideal seja selecionado para cada caso clínico especificamente. Assim, o objetivo do presente artigo é realizar uma revisão de literatura e discussão sobre as principais diferenças entre dentes e implantes, os conceitos oclusais aplicados na implantodontia, os fatores de sobrecarga aos implantes e a aplicabilidade clínica dos esquemas oclusais indicados para as próteses implanto-suportadas.